冬蟲(chóng)夏草，是麥角菌科真菌冬蟲(chóng)夏草寄生在蝙蝠蛾科昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)上的子座及幼蟲(chóng)尸體的復(fù)合體，是一種傳統(tǒng)的名貴滋補(bǔ)中藥材，有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能、抗腫瘤、抗疲勞等多種功效。

冬蟲(chóng)夏草生長(zhǎng)在寒冷高海拔的地區(qū)，其生長(zhǎng)的環(huán)境和條件比較苛刻。由于野生蟲(chóng)草的生長(zhǎng)環(huán)境不斷受到破壞，蟲(chóng)源銳減，加上人為采集的過(guò)量過(guò)早，導(dǎo)致野生蟲(chóng)草資源日益匱乏。為了滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，人工培養(yǎng)冬蟲(chóng)夏草成為了主要的來(lái)源。

但因?yàn)槠涔に噺?fù)雜，生長(zhǎng)周期長(zhǎng)及產(chǎn)量低的問(wèn)題就出現(xiàn)人工發(fā)酵冬蟲(chóng)夏草的方法。通過(guò)科研工作者的不斷研究，發(fā)現(xiàn)人工發(fā)酵蟲(chóng)草菌絲體其主要藥理藥化成分基本類(lèi)似于天然蟲(chóng)草，這就為冬蟲(chóng)夏草人工發(fā)酵奠定了重要的理論支持。

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種液體發(fā)酵產(chǎn)生冬蟲(chóng)夏草菌粉的方法，克服了現(xiàn)有技術(shù)中冬蟲(chóng)夏草液體發(fā)酵周期過(guò)長(zhǎng)、菌絲得率低以及發(fā)酵罐利用率低等問(wèn)題。

本發(fā)明包括如下步驟：

1）斜面菌種培養(yǎng)：配制斜面培養(yǎng)基，所述斜面培養(yǎng)基的組分為：葡萄糖15～35g/L、蛋白胨0.5～4g/L、MgSO4·7H2O1～5g/L、KH2PO40.5～1g/L、土豆浸汁150～250mL/L、輔液Ⅰ1～4mL/L、瓊脂20～25g/L、其余為水，pH5.9～6.6，以上各組分除輔液Ⅰ外，于121℃滅菌30min，輔液Ⅰ于118℃單獨(dú)滅菌22min后加入無(wú)菌培養(yǎng)基，接種環(huán)粘少量無(wú)菌水，把冬蟲(chóng)夏草菌種從保藏斜面上接入無(wú)菌斜面進(jìn)行培養(yǎng)，待斜面長(zhǎng)滿(mǎn)新鮮成熟孢子即可；

2）大米孢子培養(yǎng)：配制固料培養(yǎng)基，由固料以及營(yíng)養(yǎng)液組成，其中固料∶營(yíng)養(yǎng)液=1g∶（0.5～0.7）mL，固料由大米和麩皮組成，其中大米∶麩皮按質(zhì)量比為7∶3，營(yíng)養(yǎng)液組分除去瓊脂以外與斜面培養(yǎng)基的組分相同，固料與營(yíng)養(yǎng)液混勻后75～80℃蒸或煮，冷卻至室溫后將成團(tuán)的大米弄散，裝入K瓶，121℃滅菌30～40min，滅菌完后充分抖散，使固料培養(yǎng)基厚度保持在1～4cm，向長(zhǎng)滿(mǎn)孢子的斜面加入無(wú)菌生理鹽水，用接種鏟將孢子刮下，將孢子濃度控制在1.0～2.5×10 個(gè)/mL，按固料質(zhì)量體積比的3%～6%將孢子懸液均勻的噴在固料培養(yǎng)基的表面，抖動(dòng)均勻后保持厚度在1～4cm，培養(yǎng)條件為濕度控制45%～55%，溫度控制15～18℃，每隔6h翻抖一次固料，待長(zhǎng)出菌絲體后靜止培養(yǎng)，長(zhǎng)滿(mǎn)孢子后加入無(wú)菌生理鹽水震蕩制成孢子懸液，其中每粒親米孢子數(shù)量為0.02～0.04×10 個(gè)/粒，按照體積比為1%～5%接入一級(jí)種子罐培養(yǎng)；

 3）發(fā)酵培養(yǎng)：把步驟2）培養(yǎng)好的孢子接入一級(jí)種子罐，培養(yǎng)條件為pH維持在5.9～6.6、溫度18～20℃、罐壓0.03～0.05MPa、通氣比V∶V=1∶（0.5～0.8）、轉(zhuǎn)速為130～170r/min、連續(xù)培養(yǎng)50～70h，待菌絲長(zhǎng)稠呈絲狀，菌絲團(tuán)大小均一，有中小空泡即可移入二級(jí)發(fā)酵罐；

 4）制備菌粉： 收集發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾，用無(wú)菌水洗滌菌體、過(guò)濾，重復(fù)三次，然后離心收集菌體，將菌體置于60℃烘干至衡重，用超微粉碎法將干的菌體制成菌粉。

按照上述工藝發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲(chóng)夏草菌粉能夠有效縮短發(fā)酵時(shí)間，約為120～160h，菌體產(chǎn)率達(dá)到4%～6%，菌體干重達(dá)到40～60g/L，提高發(fā)酵罐利用率及產(chǎn)能，節(jié)約生產(chǎn)成本，能達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的要求。